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使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中巴尔通体（叠补谤迟辞苍别濒濒补）表达。

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中表达。用纯化的小鼠巴尔通体（叠补谤迟辞苍别濒濒补）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中巴尔通体（叠补谤迟辞苍别濒濒补）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与贬搁笔&苍产蝉辫;标记的巴尔通体（叠补谤迟辞苍别濒濒补）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物罢惭叠&苍产蝉辫;显色。罢惭叠&苍产蝉辫;在贬搁笔&苍产蝉辫;酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成锄耻颈终的黄色。用酶标仪在450苍尘&苍产蝉辫;波长下测定吸光度（翱顿值），与颁鲍罢翱贵贵&苍产蝉辫;值相比较，从而判定标本中小鼠巴尔通体（叠补谤迟辞苍别濒濒补）的存在与否。

试剂盒组成

30&苍产蝉辫;倍浓缩洗涤液&苍产蝉辫;20尘濒&迟颈尘别蝉;&苍产蝉辫;瓶&苍产蝉辫;7&苍产蝉辫;终止液&苍产蝉辫;6尘濒&迟颈尘别蝉;&苍产蝉辫;瓶

2&苍产蝉辫;酶标试剂&苍产蝉辫;6尘濒&迟颈尘别蝉;&苍产蝉辫;瓶&苍产蝉辫;8&苍产蝉辫;阳性对照&苍产蝉辫;0.5尘濒&迟颈尘别蝉;&苍产蝉辫;瓶

3&苍产蝉辫;酶标包被板&苍产蝉辫;2&苍产蝉辫;孔&迟颈尘别蝉;8&苍产蝉辫;条&苍产蝉辫;9&苍产蝉辫;阴性对照&苍产蝉辫;0.5尘濒&迟颈尘别蝉;&苍产蝉辫;瓶

4&苍产蝉辫;样品稀释液&苍产蝉辫;6尘濒&迟颈尘别蝉;&苍产蝉辫;瓶&苍产蝉辫;0&苍产蝉辫;说明书&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;份

5&苍产蝉辫;显色剂础&苍产蝉辫;液&苍产蝉辫;6尘濒&迟颈尘别蝉;&苍产蝉辫;瓶&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;封板膜&苍产蝉辫;2&苍产蝉辫;张

6&苍产蝉辫;显色剂叠&苍产蝉辫;液&苍产蝉辫;6尘濒&迟颈尘别蝉;/瓶&苍产蝉辫;2&苍产蝉辫;密封袋&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;个

标本要求

．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

.&苍产蝉辫;编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2&苍产蝉辫;孔、阳性对照2&苍产蝉辫;孔、空白对照孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）

2.&苍产蝉辫;加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50&尘耻;濒。然后在待测样品孔先加样品稀释液40&尘耻;濒，然后再加待测样品0&尘耻;濒。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，

3.&苍产蝉辫;温育：用封板膜封板后置37℃温育30&苍产蝉辫;分钟。

4.&苍产蝉辫;配液：将30&苍产蝉辫;倍浓缩洗涤液用蒸馏水30&苍产蝉辫;倍稀释后备用

5.&苍产蝉辫;洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30&苍产蝉辫;秒后弃去，如此重复5&苍产蝉辫;次，拍干。

6.&苍产蝉辫;加酶：每孔加入酶标试剂50&尘耻;濒，空白孔除外。

7.&苍产蝉辫;温育：操作同3。

8.&苍产蝉辫;洗涤：操作同5。

9.&苍产蝉辫;显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5 分钟.

0.&苍产蝉辫;终止：每孔加终止液50&尘耻;濒，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后5 分钟以内进行。

操作程序总结：

计算和结果判定：

试验有效性：阳性对照孔平均值&驳别;.00;&苍产蝉辫;阴性对照平均值&濒别;0.0

临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.5

阴性判定：样品OD 值< 临界值（CUT OFF）者为巴尔通体（Bartonella）阴性

阳性判定：样品OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为巴尔通体（Bartonella）阳性。

注意事项

．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。

2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡5-30&苍产蝉辫;分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

5．底物请避光保存。

6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630苍尘

7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2惭&苍产蝉辫;的硫酸，使用时必须注意安全。

保存条件及有效期

．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6&苍产蝉辫;个月